Harmonix Studios heeft de definitieve tracklist van Rock Band vrijgegeven. Sommige nummers zijn al veertig jaar oud en binnenkort kunnen wannabe artiesten deze nummers gaan naspelen. De volgende nummers zitten in het spel:

1960s
Rolling Stones "Gimme Shelter"

1970s
Aerosmith “Train Kept a Rollin’”*
The Who "Won't Get Fooled Again"
Boston “Foreplay/Long Time”
Mountain "Mississippi Queen"*
The Police “Next to You”
David Bowie "Suffragette City"
Black Sabbath "Paranoid"*
Blue Oyster Cult "Don't Fear the Reaper"
The Ramones "Blitzkrieg Bop"
Deep Purple "Highway Star"
KISS "Detroit Rock City"
Molly Hatchet “Flirtin’ With Disaster”
The Outlaws “Green Grass & High Tides”*
Sweet “Ballroom Blitz”*

1980s
Rush "Tom Sawyer"*
Bon Jovi "Wanted Dead or Alive"
The Clash "Should I Stay or Should I Go"
Faith No More "Epic"
R.E.M. “Orange Crush”
Iron Maiden “Run to the Hills”*

1990s
Foo Fighters "Learn to Fly"
Metallica "Enter Sandman"
Nirvana "In Bloom"
Stone Temple Pilots "Vasoline"
Weezer "Say It Ain't So"
Smashing Pumpkins "Cherub Rock"
Radiohead "Creep"
Beastie Boys "Sabotage"
Hole "Celebrity Skin"
Garbage "I Think I'm Paranoid"
Soundgarden "Black Hole Sun"

2000s
The Hives "Main Offender"
Queens of the Stone Age "Go With the Flow"
The Strokes "Reptilia"
Jet "Are You Gonna Be My Girl"
OK Go "Here It Goes Again"
Nine Inch Nails "The Hand That Feeds"
Pixies "Wave of Mutilation"
Yeah Yeah Yeahs "Maps"
Red Hot Chili Peppers "Dani California"
Coheed & Cambria “Welcome Home”
Fallout Boy “Dead on Arrival”
The Killers “When You Were Young”
New Pornographers “Electric Version”

Naast deze 45 nummers zijn er ook nog dertien nummers die je kan vrijspelen wanneer je verder bent in het spel.

In Rock Band kan je met verschillende instrumenten spelen. Je kan naast een gitaar ook aan de slag met een microfoon en drumstel. Rock Band zal begin 2008 verschijnen voor de Xbox 360, PlayStation 3 en PlayStation 2.